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PCR试验和HIV抗体检测的洁净实验室设计           ★★★ 【字体:
PCR试验和HIV抗体检测的洁净实验室设计
作者:林军明等    文章来源:浙江疾控中心    点击数:    更新时间:2010-5-23    

 

PCR试验和HIV抗体检测的洁净实验室设计

林军明1 杨更发1 唐峰2 许凌2 陆龙喜1
1.浙江省疾病预防控制中心 2.浙江省计划生育科学技术研究所
2003-01-24

插图:PCR试验和HIV抗体检测的洁净实验室设计

 

材料与方法
PCR试验实验室设计
HIV实验室设计
结果
讨论
相关阅读

   

    生物洁净室主要控制各种微生物微粒对工作环境的污染。近几年来, 在医疗、疾病控制、微生物检测, 血清学检测,分子生物研究等方面广泛应用,但医疗、卫生、疾病控制、科研单位,在建造生物洁净室时, 基本上延用了工业洁净室的原则, 而没有按生物洁净室的要求设计、施工和验收, 明确的说,没有根据该洁净室即将开展某一生物学试验及该生物对环境污染和保护操作人员的安全来设计、建造和验收[1] 。本次实验对PCR试验洁净实验室和HIV抗体检测洁净实验室进行设计和评价。

 

材料与方法

1 设备

    尘埃粒子计数仪(KR11-B),风速测试仪(EM8), 数字压差计(AXD550), 数显温湿度仪(485-2型),数显声级计(HS5920),微生物采样仪(生物梅里埃公司生产)。

2 培养基

    营养琼脂(浙江省疾控中心综合经营部)

3 方法

    按(JGJ71-90)《洁净室施工及验收规范》 (GB50073-2001)《洁净厂房设计规范》 , 医院洁净手术部建设标准(卫生部、建设部2000)、(GB50243-97)《通风与空气工程施工及验收规范》、(GB/T16292-GB/T16294-1996)《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》要求,检测了洁净度、压差、沉降菌、室内温度、相对湿度、噪声、各送风口风速, 新风比例、换气次数等。

4 设计

4.1 PCR试验实验室设计:

    PCR试验室共分4个实验区,从③ 至⑦ 为PCR实验区见图1。③ 为缓冲区;④ 为样品处理区;⑤ 为实验前准备;⑥ 为基因扩增区:⑦ 为产物检测区。各区间均有传递窗传递样品。

技术要求:

(1)洁净度:实验前准备区:局部5级,环境7级;其他各区均为7级。
(2)风流: 为乱流、上送、下回。送风口在工作人员实验操作位置上方。
(3)新风比例:20%~30%。
(4)换气次数>50次/h,达到人均40m³。
(5)压差:实验区④ ~⑦均为正压>缓冲区③。

4.2 HIV实验室设计:

    HIV实验室分二区:清洁区⑧ ,污染区⑨ ,见图1。

PCR和HIV洁净实验室 图

[图1  PCR和HIV洁净实验室示意图]

技术要求:

(1)洁净度: 污染区局部为5级,环境和清洁区为7级。
(2)风流:为乱流,上送,下回,全排,送风口在工作人员实验操作上方。
(3)新风比例:20%~30%。
(4)换气次数>50次/h,达到人均40m³。
(5)压差:污染区⑨ <清洁区⑧ 为相对负压, 清洁区⑧ 为正压>缓冲区② 。

结果

    检测结果表明:各项指标均符合设计要求,洁净室的各项指标要求,见表1。

PCR和HIV洁净实验室的各项指标要求

[表1 洁净室的各项指标要求]

讨论

    洁净室是利用空气洁净技术创造洁净微环境的最重要和最具有代表性的措施,就其控制的对象而言,分工业洁净室和生物洁净室两大类。

    生物洁净室是在工业洁净室的基础上发展为控制生物微粒的污染为主要任务。近年来,生物洁净已在医疗单位,疾控单位, 研究单位等广泛使用。但设计和建造,原则仍按工业洁净室的基本要求, 而未考虑到生物洁净室的特殊性。设计PCR试验和HIV抗体检测洁净实验室, 应考虑到以下几方面的问题:

    ① 在实验操作过程中,由于气流等动力的作用,样品会造成室内气溶胶,为保护工作人员的安全,工作人员操作位置上应有净化的新鲜空气进入,使工作人员呼吸有足够的新鲜空气,进入室内的空气是洁净、安全的。产生的生物微粒通过下部回风口。处理后排放到室外。

    ② 实验操作不受外来的生物污染,影响其结果的准确性。

    ③ 由于一般洁净实验室的面积比较小, 空气通过空凋,风机送入洁净室内易造成较大的噪声, 应控制在<55分贝。

    ④ 压差:HIV实验室污染区,应为相对负压,使室内已污染的空气,不会从门及缝扩散到其他室内。必须从回风室排到室外。其他各室均为正压;

    ⑤PCR试验的实验前准备区应设为局部5级,环境7级,HIV抗体检测洁净实验室的污染区在有条件的情况下设为局部5级, 环境7级,保证实验不受污染。

    本次设计的PCR试验洁净室和HIV抗体检测洁净室通过检测,各项指标达到不同的工作任务和内容要求,控制生物活性微粒等,保证室内有良好的微小环境,达到真正的生物洁净要求。

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