四种空气采样方法检测层流病房
动态环境结果比较

赵心懋 袁晓宁 徐欣欣 申玉玲
(北京大学第三医院感染管理科,北京　100083)

提要　目的　调查我院使用中的层流洁净病房的空气质量,比较四种采样方法的相关性。方法　用平板沉降法、LWC - Ⅰ型离心式空气微生物采样器、JWL - ⅡB型和JWL - ⅡC型撞击式空气微生物监测仪等4种采样方法进行了检测比较。结果　本医院层流洁净病房空气中自然菌总数符合Ⅱ类环境要求。4种空气采样方法采集到的平均细菌总数由平板沉降法～JWL - ⅡC型撞击式采样器依次为: 75 cfu /m3、96 cfu /m3、85 cfu /m3 和104 cfu /m3 ,各方法之间无明显差别。JWL - ⅡC型撞击式多功能空气微生物监测仪与平皿沉降法的结果一致率最好(73. 0% ) 。结论　4种空气采样方法的采样检测结果无显著差异( P > 0. 05) ,该医院外科层流洁净病房的空气含菌量符合Ⅱ类环境要求,达到国家规定10万级层流洁净病房的要求。

关键词　层流空气;层流病房;采样方法;空气质量

COMPARISON OF THE RESULTS OF MONITORING THE ENVIRONMENT OF LAM INAR- FLOW WARD BY FOUR KINDS OF A IR SAMPL INGMETHODS

Abstract 　Objective　To investigate the air quality of the laminar - flow clean ward used in this hosp ital and to compare the relations to four samp lingmethods. 　Methods　The monitoring results using four samp lingmethods including flat slab exposure method, LWC Type - 1 Centrifugal Samp ler of airmicroorganisms, JWL Type - ⅡB and JWL Type - ⅡC Clash Samp ler of airmicroorganisms were compared. 　Results　The total natural bacterial count in air of laminar - flow clean ward of this hosp ital fulfilled the requirement of class - Ⅱenvironment. The average total bacterial counts collected by the 4 air samp lingmethods in order from flat slab exposure method to JWL Type - ⅡC Clash Samp ler of airmicroorganismswere 75 cfu /m3 , 96 cfu /m3 , 85 cfu /m3 and 104 cfu /m3 , with no significant difference between the differentmethods. The con2 formation rate between the results of JWL Type - ⅡC ClashMultifunctional Samp ler of airmicroorganisms and flat slab ex2 posure method was the best (73. 0% ). 　Conclusion s　The monitoring results of samp ling by 4 air samp lingmethods had no significant difference ( P > 0. 05). The bacteria content in air of surgical laminar - flow clean ward in this hosp ital ful2filled the requirement of class - Ⅱ environment and the requirement of state - specified 105 - grade laminar - flow clean ward.

Key words　lam inar - f low air; lam inar - f low ward; sam pling m ethod; air quality

　国家标准《医院洁净手术室标准》规定10万级层流洁净病房的空气细菌总数≤175 cfu / m3〔1〕,《医院消毒卫生标准》规定医院Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类环境室内环境空气中细菌总数依次为≤10 cfu /m3、≤200 cfu /m3、≤500 cfu /m3、为合格标准。此两种标准是一种在洁净处理后无人活动条件下的标准,真正造成医院感染的因素是在日常操作过程中,动态时的人员、仪器活动等因素对病房的空气造成的不同程度污染。为了解层流病房在动态环境中空气含菌量,并且比较平板沉降法( flat slab exposure)与LWC- Ⅰ型离心式采样器( Type - ICentrifugal Samp ler ofairmicroorganisms) 、JWL - ⅡB 型和JWL - ⅡC型撞击式空气微生物监测仪(Type - IIB and Type - IIB Clash Samp ler of airmicroorganisms)等4种浮游菌采样法在监测时的异同性,我们对本院4间正在使用的10万级层流洁净外科重症监护病房( ICU)的空气质量进行了检测。现将结果报告如下。

1　方法

1. 1 采样方法

    试验观察场所选择3间使用中的10万级层流洁净外科重症监护病房及一间备用病房。采样方法分别为沉降菌用直径90 mm和50 mm的营养琼脂平板作自然暴露法采样,浮游菌采样分别用LWC -Ⅰ型离心式空气微生物采样器(内装营养琼脂采样条) 、JWL - ⅡB型和JWL - ⅡC型撞击式空气微生物监测仪(内装营养琼脂采样平板)进行采样。采样在室内环境条件完全相同条件下,采样点设在室内4角及中央设5点于回风口处,分别采用4种方法进行采样。将采样后的采样条及营养琼脂平板置于37℃,培养24 h观察结果;对有菌生长的平板进行细菌分类检验。试验连续重复4次。具体操作和
细菌总数计算详见表1。结果统计分析用SPSS11. 0软件对不同采样方法得到检测结果进行配对T检验,并比较不同型的空气采样仪与沉降法的检测结果的相关性。

2 结果

2. 1 四种采样方法采集菌数比较

    结果表明,每种采样方法连续进行了52次采样试验,每次采样平均菌落数依次为平板沉降法为6cfu /次,LWC - I型采样器为8 cfu /次, JWL - IIB 和JWL - C型采样器分别为3 cfu /次和4 cfu /次。按表1校正计算公式计算得到每种采样方法采集总菌数依次为75、96、85、104 cfu /m3。

表1　采样操作及计算方法

2. 2 不同采样方法采集的菌数和细菌种类选取

    其中一间ICU病房的所有分离到的288个菌落,进行革兰染色,经过公式校正其中革兰阳性菌1174 cfu /m3 ,革兰阴性菌174 cfu /m3 ,取每次分离到的平均细菌数经配对T检验表明各种采样方法收集到的细菌种类及数量无显著差异( P > 0. 05) 。四种采样方法不同次数采集到的革兰阳性菌和阴性
菌分布详见表2。

2. 3 三种浮游菌采样仪器采样结果

    结果表明,使用LWC - Ⅰ型离心式空气微生物监测仪、JWL - ⅡB型和JWL - ⅡC型撞击式多功能空气微生物监测仪采集到的细菌数经按表1校正公式计算得到细菌总数依次分别为5000 cfu /m3 ,4425 cfu /m3 , 5475 cfu /m3。各方法的检测结果无显著差异( P > 0. 05) 。

2. 4 不同类型空气采样器与沉降法的检验结果的比较

    由于目前国内大多数医院均使用沉降法进行环境的细菌学监测,故本次研究对不同型号的浮游菌采样仪与沉降法的相关性进行比较。结果表明,JWL - ⅡC型撞击式多功能空气微生物监测仪的一致率最好,达73. 0% (表3) 。

表3 三种类型的浮游菌空气采样仪与平皿沉降法的相关性

注:致率指其3种采样器法和平皿沉降法结果一致的比率;次要误差率指平皿沉降法结果合格而其他方法结果为不合格的比率;极重要误差率指平皿沉降法结果不合格而其他方法结果为合格的比率。

3 讨论

    目前国内大多数医院均使用沉降法进行静态环境的细菌学监测〔2, 3〕,但有研究表明真正造成医院感染的是日常操作过程中人员的活动、仪器的移动和运转等因素对病房的空气造成的不同程度污染〔4〕。因此我们通过监测动态环境初步了解医院外科ICU病房的空气质量情况,并对国内常用的几种浮游菌采样仪的监测效果进行比较。

    通过监测证实,无论采用何种方法进行检测,本医院外科ICU 病房的空气含菌量结果均符合国家规定十万级层流洁净病房的要求。本次研究的结果表明,虽然三种不同型号的浮游菌采样仪的工作原理及每分钟采集的空气量有所不同,但分离到的菌落数及种类没有明显的差异,但三种采样器方法与平板沉降法相比存在差异。JWL - ⅡC型撞击式多功能空气微生物监测仪进行环境学监测的结果同平板沉降法的一致率最好。由于仅对采集物37℃培养24 h,因此没有分离到真菌。分离到革兰阳性菌明显高于革兰阴性菌,大多数为表皮葡萄球菌(占全部分离株的87. 5% ) ,此与该病房内患者的致病菌(为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)不同,说明空气并不是医院内获得性耐药的致病菌(如MRSA等)主要传播途径〔5〕。

    在相同的条件下,室内增加人员的数量及操作次数会导致空气中浮游菌数量的增加,同时在垂直层流病房的空气净化是由压缩机将消毒过滤后的新鲜空气自上而下流入,并将污染的空气均衡地由四周推出,室内始终处于正压状态,避免污染空气的流入,本次在回风口处的采样点收集到的菌落数较其它三点多,在靠近病房门的采样点菌落数也较多。
此可能与采样者进出室内到采样地点和收集标本等活动有关。耿莉华等人的研究表明轻微活动时可散布尘埃约为106 cfu / m3 ,快速步行时则是107 cfu /m3〔4〕。所以层流病房内也应尽量减少不必要的进出及医疗操作活动。

参考文献

〔1〕　许钟麟, 梅自力, 于冬, 等. 医院洁净手术室标准[ S]. 北京:中华人民共和国卫生部, 2004: 1～3.
〔2〕　郭瑞兰. 手术室的空气层流净化与管理[ J ]. 现代医药卫生,2005; 21 (22) : 3176.
〔3〕　魏先, 阳世伟, 秦超, 等. 层流手术室动态环境中不同时间空气含菌量的研究[ J ]. 中华医院感染学杂志, 2005; 15 ( 8 ) :900.
〔4〕　耿莉华. 医院感染控制指南[M ]. 北京:科学技术文献出版社, 2004: 62.
〔5〕　孙宏莉,王辉,陈民钧, 等. 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查[ J ]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2005; 25 (2) : 137.

(2006 - 08 - 08收稿)